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C-NKGマウス

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2020年9月09日

品系名：NOD/Shi-Prkdcscid Il2rgem1/Cgen

略語：C-NKGマウス

バックグラウンド：NOD/Shi-Scid

 

C-NKGマウスはサイヤジェン株式会社がCRISPR/Cas9技術を使用してNOD/Shi-Scidバックグラウンド品系でIl2rg遺伝子をノックアウトした重度免疫不全マウスである。NKGマウスは成熟したT、B、NK免疫細胞を欠けていて、補体活性が低下し、マクロファージがヒト由来細胞に対する呑噬力が弱いため、ヒト造血幹細胞（HSC）、末梢血単核細胞（PBMC）、患者の異種移植組織（PDX）或いは成体幹細胞と組織を高効率に移植でき、免疫不全の程度が高く、腫瘍、免疫、自己免疫疾患、免疫治療ワクチン、GvHD /移植、安全性評価などの分野で優れたモデルと認められている。

 

特徴：

  • 成熟したT、BとNK細胞を欠けている。
  • 補体の活性が低い。
  • マクロファージと樹状細胞の機能が異常である。
  • 年齢が重ねているとともに、TとB細胞の漏れの発生率が極めて低い。
  • リンパ腫瘍の発生率が極めて低い（NOD scidモデルと違う）。長期実験と短期実験にも用いられる。
  • 糖尿病が発症しない。
  • NOD/scidマウスと比べ、NKGマウスは移植した人体細胞と組織の生存率が上がった。また、もっと高い比率の人類の正常或いはがん細胞と組織を移植できる。

 

応用：

  • NOD/scidマウスと比べ、NKGマウスは移植した人体細胞と組織の生存率が上がった。また、もっと高い比率の人類の正常或いはがん細胞と組織を移植できる。
  • 高効率にヒト造血幹細胞（HSC）、末梢血単核細胞（PBMC）、患者由来の異種移植物（PDX）或いは成体幹細胞と組織を移植できる。
  • 腫瘍、免疫、自己免疫性疾患、免疫治療ワクチン、GvHD/移植、安全性評価等の研究に用いられる。

 

表現型の検証：

1．Prkdc遺伝子突然変異

Prkdc遺伝子突然変異

図1．Prkdcscid突然変異はPrkdc遺伝子の84エクソンのTAT→TAAにより引き起こされる。

シークエンシング結果によると、NKGマウスはPrkdcscid突然変異を持っている。

 

2．Il2rg遺伝子ノックアウト

Il2rg遺伝子ノックアウト

図2．NKGマウスのIl2rg遺伝子に対してPCR検査を行ったところ、NKGマウスのIl2rg遺伝子は成功にノックアウトしたことを発見した。

野生型のストリップサイズ：388bp、ノックアウト部分の断片のストリップサイズ：1430bp。

 

3．C-NKGマウスの末梢血のB、T、NK細胞の検測

C-NKGマウスの末梢血のB、T、NK細胞の検測

図3．C-NKGマウスは末梢血にB、T、NK細胞が非常に欠けていて、重症免疫不全マウスである。

BALB/c、 C-NKGマウスの末梢血を取って、T 、BとNK細胞の組成に対して、代表的フロー細胞免疫表現型解析と統計対比を行う。実験結果によると、BALB/cマウスと比べ、C-NKGマウスは末梢血のB細胞（CD3-CD19+）、T細胞（CD3+CD19-）、補助性T細胞（CD3+CD4+CD8-）、細胞毒性T細胞（CD3+CD4-CD8+）、NK細胞（CD335+CD3-）は殆ど全部欠けている。

 

4．C-NKGマウスのリンパ組織のB、T、NK細胞の検測

C-NKGマウスのリンパ組織のB、T、NK細胞の検測

図4．C-NKGマウスはリンパ組織のB、T、NK細胞が非常に欠けていて、重症免疫不全マウスである。

BALB/c、 C-C-NKGマウスのリンパ組織を取って、T 、BとNK細胞の組織に対して、代表的フロー細胞免疫表現型解析と統計対比を行う。実験結果によると、BALB/cマウスと比べ、C-NKGマウスはリンパ組織のB細胞（CD3-CD19+）、T細胞（CD3+CD19-）、補助T細胞（CD3+CD4+CD8-）、細胞毒性T細胞（CD3+CD4-CD8+）、NK細胞（CD335+CD3-）はほとんど全部欠けている。

 

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サイヤジェン株式会社について

サイヤジェン株式会社は15年間の発展を経て、全世界の数万人の科学研究者にサービスを提供しており、製品と技術は直接にCNS (Cell、Nature、Science)の定期刊を含む5,200余りの学術論文に応用されています。弊社の「ノックアウトマウスライブラリ」は低価格だけでなく、遺伝子名称を入力すれば、ワンクリックで注文まで操作できます。 ノックアウトマウス、ノックインマウス、コンディショナルノックアウトマウス、トランスジェニックマウス、GFPマウス、免疫不全マウス、無菌マウスなどのカスタマイズサービスを提供する以外、専門的な手術疾患モデルチームがあり、多種の複雑な小動物手術疾患モデルも提供できます。

 

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