ノックイン(knock-in, KI)マウスは、標的遺伝子位置に特定の突然変異または外来遺伝子を導入するか、レポーター遺伝子を同種再構成で標的遺伝子の特定位置に導入することにより、レポーター遺伝子の発現を通じて標的遺伝子の発現を追跡することができます。
1. ノックイン(KI)とは何ですか
遺伝子ノックイン(Knock-in)とは、標的遺伝子位置に特定の突然変異または外来遺伝子を導入し、例えば、標的遺伝子に突然変異を導入するか(人間遺伝病モデルを再現する)、レポーター遺伝子(例えばEGFP、RFP、mCherry、YFP、LacZ、Luciferase等)または発現必要な機能的cDNA(例えばCre、Dre等)を同種再構成で標的遺伝子の特定位置に導入することにより、レポーター遺伝子またはその他cDNAの発現を標的遺伝子の発現に一致させます。レポーター遺伝子またはcDNAでマウス自身の遺伝子を置換すると、ノックアウトとノックインが同時に発生します。ヒト由来遺伝子でマウス由来遺伝子を置換するまたはヒト由来cDHAをマウス由来遺伝子のATG位置に挿入することにより、ヒト化マウスモデルをカスタマイズすることもできます。
2. 何故ノックイン(KI)マウスを使用するでしょうか
ノックイン(KI)マウスは薬品新標的の発見と臨床前の薬力学評価等、生物医学の研究に重要な理論的価値と臨床意義があります。
3. 遺伝学ノックイン(Knock-in)モデルの分類
4. ノックイン(KI)マウスモデルの構築方法は何がありますか?
遺伝学ノックインマウスモデルはCRISPR/Cas9またはESターゲティング技術により構築できます。サイヤジェンは300 kbのラージフラグメントノックイン(LFKI)ができます。
TurboKnockout®
CRISPR/Cas9
原理
ESCにおけるTurboKnockout® 技術の同種再構成
CRISPR/Cas9ヌクレアーゼを介した遺伝子前核注射法
応用
コンディショナルノックアウトマウス
点突然変異
ラージフラグメントノックイン
ヒト化
Global knockout
ノックインフラグメントのサイズに制限有
遺伝子定位は毎回約20kb
RMCEヒト化:約300kb
外来ノックイン:~15 kb
Rosa26/H11遺伝子座:~12 kb
コンディショナルノックアウト
単標的:~7 kb
両標的:~100 kb
Donor vector: ~7 kb
ssDNA: ~100 kb
ベクター背景
マウス品種:C57BL/6, BALB/c
マウス品種:C57BL/6, FVB
ラット品種:Sprague-Dawley (SD), Long Evans
サイクル
6-8 ヶ月
5-7 ヶ月
ご興味をお持ちいただけましたら、[email protected]までお問い合わせください。
サイヤジェン株式会社について
サイヤジェン株式会社は15年間の発展を経て、全世界の数万人の科学研究者にサービスを提供しており、製品と技術は直接にCNS (Cell、Nature、Science)の定期刊を含む5,200余りの学術論文に応用されています。弊社の「ノックアウトマウスライブラリ」は低価格だけでなく、遺伝子名称を入力すれば、ワンクリックで注文まで操作できます。 ノックアウトマウス、ノックインマウス、コンディショナルノックアウトマウス、トランスジェニックマウス、GFPマウス、免疫不全マウス、無菌マウスなどのカスタマイズサービスを提供する以外、専門的な手術疾患モデルチームがあり、多種の複雑な小動物手術疾患モデルも提供できます。