Cre-loxシステムを使用し、特定細胞、組織或いは個体で、特定の時点にもある遺伝子をノックアウト・発現でき、特定遺伝子の時空特異性の操作を実現できました。これは遺伝子機能の研究と人類疾患動物モデルの構築に深い影響があります。
- 1. コンディショナルノックアウト:floxマウスをCreマウスと交配させて、特定遺伝子に対して組織特異性ノックアウトまたは誘導性ノックアウトを行います。例えば、KO-firstコンディショナル対立遺伝子の策略における応用。
- 2. コンディショナル過剰発現:目的遺伝子の前にloxp-stop-loxp配列を導入し、creを発現しない限り、目的遺伝子を発現できません。creを発現した時、loxp-stop-loxp配列が削除され、目的遺伝子を発現します。
- 3. レポートマウスを作製し、Creマウスの特異性を検証する:例えばTdTomatoマウスなど、正常状況でstopが存在するので、赤い蛍光を発現しません。Creマウス或いはTAMの活性化したCreERT2マウスと交配させた後、TdTomatoが発現され、Cre或いはCreERT2が発現した組織に赤い蛍光を発生できます。