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ノックイン細胞株
遺伝子調節の研究、疾患モデル構築、薬剤スクリーニングに向けた、部位特異的修飾を活用した実験を推進します。サイヤジェン (Cyagen) のノックイン細胞株は、レポーター、ポイント変異、またはフュージョンタグの一貫した挿入を提供し、次なる研究プロジェクトにおいて確実な知見を得るための検証済みソリューションを提供いたします。
短納期
カスタムノックアウト細胞株を最短2週間で納品できます。
専門家によるガイド
モデル選定および実験整合(experimental alignment)に関する無料技術コンサルテーションを短時間で提供します。
成果保証
お約束の納品を実現いたします。万が一、ご期待に沿えなかった場合、ご返金いたします。
ワークフロー
FAQs
ワークフロー
ノックイン細胞株:明確なゲノム改変
サイヤジェン (Cyagen) のターゲット遺伝子編集細胞株は、予め定められた遺伝子座に正確に導入されたサイト特異的DNA挿入を確立しており、その挿入部位は明確に記録されています。各モデルは包括的な品質管理(QC)ドキュメントに基づき、厳格な検証を経ており、遺伝子機能の解析やタンパク質の追跡、疾患モデルの構築において高い実験再現性を実現します。
ワークフローと納品
サイヤジェン(Cyagen)は、さまざまな研究用途に向けた正確な遺伝子改変を実現するノックイン(KI)細胞株作製のための効率的なプロセスを提供します。当社のワークフローは、遺伝子設計から最終的な細胞株の検証に至る全工程を網羅し、各段階で厳格な品質管理を実施します。十分に特性解析された安定的な細胞株に加え、包括的なレポートおよびシーケンシングデータを納品し、お客様の研究に信頼性の高いモデルを提供します。
ノックイン細胞株
iPS細胞ノックイン細胞株
ノックイン細胞株
ノックイン細胞株の作製および納品
サイヤジェン(Cyagen)は、ノックイン(KI)細胞株作製のための効率的なプロセスを提供し、正確な遺伝子導入と高品質な研究モデルの構築を実現します。以下に、ノックイン細胞株作製における標準的なワークフロー、想定納期、および納品内容を示します。
納品内容および品質管理
細胞種 代表的な細胞株 納品内容 品質管理(QC)
腫瘍細胞および免疫細胞 Jurkat、HepG2、SK-MES-1 ノックインクローン+対応するWTコントロール(各2バイアル、10⁶ cells/vial)+検証レポート PCR、サンガーシーケンシング
非がん性細胞 HK-2、AC16
ワークフローおよびスケジュール
工程 説明 納期
細胞増殖およびQC 1. マイコプラズマおよび無菌試験。
2. 細胞増殖能の評価。
3. 標的領域シーケンシング用プライマー設計。
1~2週間
ガイド分子およびドナーベクター設計 1. 遺伝子ターゲティング用ガイド分子の設計および合成
2. ドナーベクターの設計および構築
5~7週間
エレクトロポレーションおよびクローン選抜 1. 標的細胞へガイド分子をエレクトロポレーションにより導入。
2. 単一クローンをスクリーニングし、ゲノムDNAを抽出後、PCRおよびシーケンシングによりノックインを検証。
4~8週間
細胞凍結保存およびQC 1. ノックイン部位の配列解析。
2. マイコプラズマおよび無菌試験。
3. 生存率試験。
1~2週間
注:推定総期間: 11~19週間
iPS細胞ノックイン細胞株
iPS細胞ノックイン細胞株の作製および納品
iPS細胞ノックイン細胞株作製において、サイヤジェン(Cyagen)は、幹細胞の多能性および分化能を維持しつつ、正確な遺伝子導入を実現するための最適化ワークフローを提供します。以下に、想定スケジュールおよび納品内容を含むワークフローを示します。
納品内容および品質管理
細胞種 代表的な細胞株 納品内容 品質管理(QC)
iPS細胞ノックイン細胞株 H1、H9、iPS細胞 分化細胞株または未分化細胞株 PCR、サンガーシーケンシング、免疫蛍光染色(IF)
ワークフローおよびスケジュール
工程 説明 納期
細胞増殖およびQC 1. マイコプラズマおよび無菌試験。
2. 細胞増殖能の評価。
3. 標的領域シーケンシング用プライマー設計。
1~2週間
ガイド分子およびドナーベクター設計 1. 遺伝子ターゲティング用ガイド分子の設計および合成。
2. ドナーベクターの設計および構築
5~6週間
エレクトロポレーションおよびクローン選抜 1. 標的iPS細胞へガイド分子をエレクトロポレーションにより導入。
2. 単一クローンをスクリーニングし、ゲノムDNAを抽出後、PCRおよびシーケンシングによりノックインを検証。
4~8週間
細胞凍結保存およびQC 1. ノックイン部位の配列解析。
2. マイコプラズマおよび無菌試験。
3. 生存率試験。
4. 多能性マーカーを確認するための免疫蛍光染色。
1~2週間
注:推定総期間: 11~18週間
細胞株開発プロジェクト特別キャンペーン
失敗リスクや工数のお悩みではございませんか?本キャンペーンでは、要件整理から厳重な品質検証までをプロフェッショナルがフルサポート。スケジュールが見える短期間対応で、研究のスピードアップを実現します。 今なら日本国内の新規ユーザー限定で特典あり!
関連製品・サービスのご案内
ノックアウト細胞株ライブラリ
基因または細胞種別で検証済みヒトKO細胞株を検索
腫瘍細胞株ライブラリ
がん種別または遺伝学的状態で特性解析済みのヒト腫瘍細胞株にアクセス
細胞免疫療法 CRO サービス
カスタムベクター・モデルおよびin vivo検証を活用したCAR-T/NK細胞の開発
ターゲット遺伝子編集
AIを活用したHDR技術による高精度なin vivoゲノムエンジニアリング
MouseAtlasモデルライブラリ
検索およびカスタマイズされた遺伝子改変マウス系統のアクセス
AAVベクター・ライブラリ
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FAQs
Frequently Asked Questions (FAQs)
アルツハイマー病研究向けAPOE4点突然変異導入株の作成において、変異がタンパク質の折りたたみに影響を及ぼすことを裏付ける機能的検証を提供いただけますか。
完全配列解析およびクローン検証を実施したAPOE4変異細胞株を提供しており、タンパク質発現レベルの確認も実施しております。機能的検証(例:折りたたみアッセイなど)は標準的なサービス項目ではございませんが、お客様と協働してカスタム実験の設計をサポートするほか、表型解析のための後続パートナーをご提案も可能です。当社のHepG2細胞を用いた事例を通じて、機能的研究プロトコルへの包括的支援能力を実証しております。
特定のオフターゲット効果の有無を、主要な挿入部位以外で確認するために、どのような検証手法をご利用になりますか。
当社では以下の検証手法を採用しております。
·標的座位の完全性を確認するためのサンガーシーケンスです。
·インサートサイズと向きを確認するためのPCRベースのスクリーニングです。
·意図しない機能影響を除外するための細胞生存性アッセイです。
全ゲノム規模のオフターゲット解析は明示していませんが、厳格なQC(細胞の100%無汚染、マイコプラズマ/細菌の二重検査)により信頼性の高い結果を保証します。
抗体開発プロジェクト向けに、マウス細胞株を用いたヒト化タンパク質発現サービスは提供されていますか。
はい。当社のKIサービスには、マウス細胞株でのヒト化タンパク質発現が含まれ、抗体開発などの用途に活用できます。例えば、マウスにおけるヒト化タンパク質相互作用を研究するため、SR-BI変異HepG2細胞を作製しました。種特異的なタンパク質置換やエピトープタグ付加などのカスタム要望にも対応可能です。
同一細胞株で複数遺伝子編集を同時に実施できますか。また、検証(validation)のタイムラインにどのような影響がありますか。
はい、複数遺伝子同時編集に対応可能です。当社のケーススタディでは、HepG2細胞株に二か所の点突然変異を導入する事例を実証しています。追加のシークエンシングおよび品質確認が必要となるため、検証期間が若干延長される場合がございますが、単細胞クローン化および複数ステップのシークエンシングを含む標準化されたワークフローにより、きめ細かな特徴解析を実現しています。納期はプロジェクトの性質により異なりますが、見積もり段階で個別にご説明いたします。
初代ニューロンのような導入困難な細胞系で、大型インサート(>2kb)のノックインの一般的な効率はどの程度ですか。
Cell iGeneEditor™ システムは、遺伝子ノックイン(KI)において最大90%の編集効率を達成しています。挿入サイズや細胞種類によって結果に差が生じる場合がありますが、当社が最適化した相同組換えプロトコルおよび、SH-SY5YやU251など神経系細胞ラインを含む多様な細胞種への豊富な実績により、信頼性の高い結果を提供いたします。トランスフェクションが困難な細胞については、事前に実験を実施し、導入法の検証と最適化を実施いたします。当社の細胞バンクには一次神経細胞は明示されておりませんが、カスタムプロジェクトの評価については、お気軽にお問い合わせください。
引用データベース
Molecular Therapy: Methods & Clinical Development, March, 2025
Intracranial AAV administration dose-dependently recruits B cells to inhibit the AAV redosing
【その他】
Gut, February, 2025
E-twenty-six-specific sequence variant 5 (ETV5) facilitates hepatocellular carcinoma progression and metastasis through enhancing polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cell (PMN-MDSC)-mediated immunosuppression
【その他】
Cell Death & Disease, February, 2025
Mcm5 mutation leads to silencing of Stat1-bcl2 which accelerating apoptosis of immature T lymphocytes with DNA damage
【その他】
Molecular Therapy, February, 2025
Single-cell data-driven design of armed oncolytic virus to boost cooperative innate-adaptive immunity against cancer
【その他】
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