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免疫学

C-NKGマウス

Cyagen Technical Content Team | September 09, 2020
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MouseAtlasで即納マウスモデルを検索
目次

目次

01 品種情報 02 特徴 03 応用 04 表現型の検証 05 マウスモデル検索プラットフォーム

品種情報

品系名:NOD/Shi-Prkdcscid Il2rgem1/Cgen

略語:C-NKGマウス

バックグラウンド:NOD/Shi-Scid

C-NKGマウスはCyagen株式会社が標的型遺伝子編集技術を使用してNOD/Shi-Scidバックグラウンド品系でIl2rg遺伝子をノックアウトした重度免疫不全マウスである。cKOマウスは成熟したT、B、NK免疫細胞を欠けていて、補体活性が低下し、マクロファージがヒト由来細胞に対する呑噬力が弱いため、ヒト造血幹細胞(HSC)、末梢血単核細胞(PBMC)、患者の異種移植組織(PDX)或いは成体幹細胞と組織を高効率に移植でき、免疫不全の程度が高く、腫瘍、免疫、自己免疫疾患、免疫治療ワクチン、GvHD /移植、安全性評価などの分野で優れたモデルと認められている。

特徴

  • 成熟したT、BとNK細胞を欠けている。
  • 補体の活性が低い。
  • マクロファージと樹状細胞の機能が異常である。
  • 年齢が重ねているとともに、TとB細胞の漏れの発生率が極めて低い。
  • リンパ腫瘍の発生率が極めて低い(NOD scidモデルと違う)。長期実験と短期実験にも用いられる。
  • 糖尿病が発症しない。
  • NOD/scidマウスと比べ、cKOマウスは移植した人体細胞と組織の生存率が上がった。また、もっと高い比率の人類の正常或いはがん細胞と組織を移植できる。

応用

  • NOD/scidマウスと比べ、cKOマウスは移植した人体細胞と組織の生存率が上がった。また、もっと高い比率の人類の正常或いはがん細胞と組織を移植できる。
  • 高効率にヒト造血幹細胞(HSC)、末梢血単核細胞(PBMC)、患者由来の異種移植物(PDX)或いは成体幹細胞と組織を移植できる。
  • 腫瘍、免疫、自己免疫性疾患、免疫治療ワクチン、GvHD/移植、安全性評価等の研究に用いられる。

表現型の検証

1.Prkdc遺伝子突然変異

Prkdc遺伝子の配列解析により、84エクソンにおけるTAT→TAAの変異が確認された

図1.Prkdcscid突然変異はPrkdc遺伝子の84エクソンのTAT→TAAにより引き起こされる。

シークエンシング結果によると、cKOマウスはPrkdcscid突然変異を持っている。

2.Il2rg遺伝子ノックアウト

Il2rg遺伝子のPCR解析により、ノックアウト断片(1430bp)の存在が確認された

図2.cKOマウスのIl2rg遺伝子に対してPCR検査を行ったところ、cKOマウスのIl2rg遺伝子は成功にノックアウトしたことを発見した。

野生型のストリップサイズ:388bp、ノックアウト部分の断片のストリップサイズ:1430bp。

3.cKOマウスの末梢血のB、T、NK細胞の検測

cKOマウスの末梢血ではB、T、NK細胞のマーカー発現が著しく低下している

図3.cKOマウスは末梢血にB、T、NK細胞が非常に欠けていて、重症免疫不全マウスである。

BALB/c、 cKOマウスの末梢血を取って、T 、BとNK細胞の組成に対して、代表的フロー細胞免疫表現型解析と統計対比を行う。実験結果によると、BALB/cマウスと比べ、cKOマウスは末梢血のB細胞(CD3-CD19+)、T細胞(CD3+CD19-)、補助性T細胞(CD3+CD4+CD8-)、細胞毒性T細胞(CD3+CD4-CD8+)、NK細胞(CD335+CD3-)は殆ど全部欠けている。

4.cKOマウスのリンパ組織のB、T、NK細胞の検測

cKOマウスのリンパ組織でもB、T、NK細胞の欠損が確認されている

図4.cKOマウスはリンパ組織のB、T、NK細胞が非常に欠けていて、重症免疫不全マウスである。

BALB/c、 C-cKOマウスのリンパ組織を取って、T 、BとNK細胞の組織に対して、代表的フロー細胞免疫表現型解析と統計対比を行う。実験結果によると、BALB/cマウスと比べ、cKOマウスはリンパ組織のB細胞(CD3-CD19+)、T細胞(CD3+CD19-)、補助T細胞(CD3+CD4+CD8-)、細胞毒性T細胞(CD3+CD4-CD8+)、NK細胞(CD335+CD3-)はほとんど全部欠けている。

ワンストップ・マウスモデル検索プラットフォーム:MouseAtlas

MouseAtlas(マウスアトラス)は、KOマウスからヒト化マウスまで、遺伝子や製品モデル名で検索できるプラットフォームです。生体マウスか精子凍結状態か、リアルタイムの在庫状況、検証データ、詳細な説明を直感的に確認でき、直接注文も可能です。社内の製品管理システムと連携して常に最新情報が更新されており、現在39,000種類以上のモデルマウスを収録しています。研究者の皆様にとって非常に便利なワンストップソリューションです。

>> MouseAtlasで目的の遺伝子を検索する

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