NCI-H358：KRAS G12C 突変を有する肺がんモデル

NCI-H358細胞株の概要

NCI-H358は、非小細胞肺がん（NSCLC）由来のヒト細胞株であり、KRAS遺伝子変異に関する研究で広く用いられている。KRAS G12C変異はNSCLCにおいて比較的頻度が高く、NCI-H358細胞はこの変異を保有しており、腫瘍細胞のシグナル伝達および増殖に重要な役割を果たす。KRAS G12C変異を有する腫瘍細胞は、特定のKRAS阻害薬に対して感受性を示すことがあり、そのためNCI-H358は、Sotorasib（AMG 510）などのKRAS G12Cを標的とする阻害薬のスクリーニングに特に有用である。Sotorasibは、KRAS変異タンパク質の12位システイン残基と共有結合を形成することで、その活性を阻害し、下流シグナル伝達に影響を与える。

NCI-H358細胞株の詳細情報

細胞名：NCI-H358（ヒト非小細胞肺がん細胞）

カタログ番号：TCHu151（中国科学院）

増殖特性：上皮様形態、接着性増殖

培養条件：1640培地 + 10% FBS

培養環境：空気95% + CO₂ 5%、37°C

NCI-H358細胞株の肺がん研究における応用

NCI-H358細胞は、以下の肺がん研究分野で重要な役割を果たしている：

• 薬剤スクリーニング：NCI-H358細胞は、さまざまな抗癌薬に対して感受性を示すため、特にKRAS G12C変異を標的とする薬剤の有効性評価に適したモデルとして利用される。
• 遺伝子機能解析：遺伝子ノックアウトや過剰発現実験を用いて、特定遺伝子が肺がんにおいて果たす役割を研究する際に用いられる。
• シグナル経路解析：KRAS経路に関連する細胞内シグナルネットワークの解析に利用される。
• 腫瘍微小環境の模擬：腫瘍細胞と周囲の細胞（免疫細胞やストローマ細胞など）との相互作用を研究し、腫瘍微小環境の理解を深める。

NCI-H358細胞の培養手順ガイド

細胞培養手順

• 遠心管に完全培地6 mLを加え、解凍プロセスを開始する。
• 水浴中で氷塊が米粒程度になるまで解凍し、その後水浴を停止する。
• 細胞を遠心管に移し、遠心分離を行う。
• 細胞を再懸濁し、適切なサイズの培養皿に接种する。
• 24時間後に細胞の接着状態を観察し、培地を1回交換する。

• 上澄み液を吸引し、室温のPBSで一度洗浄する。
• トリプシンを加え、皿底を均一に覆うようにする。
• 皿を軽く叩いた際に一部の細胞が剥離し始めたら、消化を停止する。
• 細胞を優しくピペットで分散させ、遠心管に移し、遠心分離を行う。
• 細胞を再懸濁し、適切な比率で再接种する。

• 消化・遠心分離により細胞ペレットを回収する。
• 凍結保存用溶液に細胞を再懸濁し、凍結用ビアルに移す。
• 4°Cで事前に冷やした制御冷却装置にビアルを配置し、翌日まで-80°C冷凍庫に保管する。
• 翌日、ビアルを液体窒素に移して長期保存する。

NCI-H358細胞培養における注意事項

• 血清の品質：高品質な胎児牛血清を使用する。必要に応じて濃度をわずかに増加させる。
• 消化のモニタリング：過度な消化を避けるため、プロセスを注意深く監視する。
• 培地の交換：細胞密度が高くなると、定期的に培地を交換するか、細胞を移植する。

NCI-H358細胞における遺伝子編集技術：Smart-Targeted Gene Editing™の活用

Cyagenは、Smart-Targeted Gene Editing™システムを用いたNCI-H358細胞株に対する包括的な遺伝子編集サービスを提供しており、精度と効率性を兼ね備えた遺伝子改変を実現している。

遺伝子改変プロジェクト

NCI-H358細胞株における遺伝子改変には、遺伝子ノックアウト（KO）、点突然変異、ノックイン（KI）、過剰発現、干渉（RNAi）が含まれる。CyagenはNCI-H358の培養条件および単クローン作成プロトコルを最適化しており、遺伝子編集された単クローン細胞の提供が可能である。これにより、実験の正確性と信頼性が向上し、腫瘍免疫学研究の基盤を強化する。

結論

NCI-H358細胞株は、特にKRAS G12C変異の研究において強力なツールである。細胞培養および遺伝子編集のベストプラクティスを遵守することで、がん生物学および治療戦略に関する新たな知見の解明が可能となる。Cyagenの遺伝子編集における専門性は、NCI-H358細胞の研究可能性をさらに高め、正確かつ信頼性の高い改変を提供し、革新的な研究を支える。

Cyagenによるカスタム細胞株遺伝子編集サービス

Cyagenは、 iPSC遺伝子編集を含む、インビトロ向けワンストップサービスプラットフォームを提供しており、高度な細胞再プログラミング、遺伝子工学、細胞分化技術を統合している。当社のワンストップ表現型解析プラットフォームと連携することで、さまざまな疾患応用における細胞株モデルの開発および検証サービスを提供可能である。最適化されたTargeted Gene Editing-Pro技術により、大規模な断片の削除、大規模断片のノックイン、点突然変異の安定発現を含む、迅速な遺伝子編集が実現可能である。

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