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PiggyBac トランスジェニックマウス胚
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PiggyBacトランスポゾンのメカニズム
１．トランスポゾン（または転移配列）
DNAの小さな断片を、ゲノム内の別の位置へと転移・挿入いたします。
２．PiggyBac
「カット＆ペースト」のメカニズムを利用し、ベクターと染色体の間で効率的に転移する移動性遺伝子エレメントです。
３．PBase
ベクター上のITR（Inverted Terminal Repeat）配列を認識し、導入遺伝子をTTAA配列の部位へと移動させて挿入いたします。
◆ PiggyBac トランスジェニックストラテジーデザイン
PiggyBacトランスジェニックマウス胚プロジェクトは、以下の段階に分かれています。
1. PiggyBac トランスジェニックストラテジーデザイン
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ご希望の導入遺伝子情報に基づき、PiggyBacトランスポゾンシステムを用いた最適なトランスジェニックストラテジーを設計いたします。
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また、ファウンダーマウスのスクリーニングに使用するPCRジェノタイピング用のプライマー設計および解析戦略も併せてご提供いたします。
2. PiggyBac トランスジェニックベクターの構築
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PiggyBacプラスミドベクターを用いて、目的の遺伝子を含むトランスジェニックベクターを構築いたします。
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必要に応じて、構築済みベクターのシークエンシングおよび制限酵素解析を通じて、構造の正確性を確認いたします。
3. PiggyBac トランスジェニック前核インジェクション
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構築したPiggyBacトランスジェニックプラスミドを受精卵の前核にマイクロインジェクションいたします。
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注入後の受精卵は代理母に移植し、PiggyBac導入遺伝子を保持する子孫を獲得いたします。
4. PiggyBac トランスジェニックマウス スクリーニング
ご指定の胚発生段階において得られた胚または子マウスに対し、PCRジェノタイピングおよび必要に応じてlacZ染色を実施し、PiggyBac導入遺伝子の挿入有無を同定いたします。
