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PiggyBacトランスジェニックマウス胚プロジェクトは、以下の段階に分かれています。
1. PiggyBac トランスジェニックストラテジーデザイン
- PiggyBac トランスジェニックストラテジーのデザイン
- ファウンダースクリーニングのためのPCRジェノタイピグストラテジーの作成
2. PiggyBac トランスジェニックベクターの構築
- PiggyBac プラスミドを用いたトランスジェニックベクターの構築
- Confirm the constructed PiggyBacを用いたトランスジェニックベクターを必要に応じてシークエンシングと制限酵素切断によって確認
3. PiggyBac トランスジェニック前核インジェクション
- PiggyBacトランスジェニックプラスミドを受精卵の前核にインジェクション
- 代理母へ受精卵を移植し、子孫を獲得
4. PiggyBac トランスジェニックマウス スクリーニング
-ご希望の胚期に獲得した胚を、PCRで遺伝子型判定lacZ染色を行い、PiggyBac導入遺伝子を有しているか同定を行う