サイヤジェンの特徴
- 作製期間の早さ
- 高品質
- グローバルサプライヤー
- リーズナブルな価格設定
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TurboKnockout® 遺伝子ターゲティング技術は、弊社独自の株化細胞構築と遺伝子改変技術です。遺伝優勢のあるTurboKnockout® 株化ES細胞を作り、マイクロインジェクションを通じて、内因性のES細胞を100%のTurboKnockout® ES細胞に組み替えます。キメラマウス段階を経ることなく、直接TurboKnockout® マウスが得られる遺伝子ターゲティング特許技術です。
3,000系統の生体ノックアウトマウス：最短2週間、僅か63万円/ペア
ノックアウトマウスライブラリ：16,000種以上のKO/cKO系統マウスを
大きな断片のノックイン、特許紛争無し、オフターゲット効果無し：ヒト化抗体マウス
６ヶ月間でノックアウト/ノックインマウスを作製可能
弊社の新技術-TurboKnockout® 遺伝子ターゲティングでは、ご希望のコンディショナルノックアウトマウス、 レポーター遺伝子ノックインマウス、及びヒト化マウスを６〜８ヶ月間で作製することができます。この技術には、二つの革新技術を導入しています:
1.TurboKnockout® スーパーES細胞：内因性ES細胞をTurboKnockout® スーパーES細胞に100%組み替えます。これにより、キメラマウス段階を経ることなく、直接ヘテロマウスを得ることができます。
2.薬剤耐性遺伝子の自動削除システム：特殊プロモーターの設計による薬剤耐性遺伝子の自動削除システムです。このシステムによって、Flpなどの特殊マウスは必要なくなり、野生型マウスと交配するだけで薬剤耐性遺伝子を除去できます。
以上の技術革新によって、TurboKnockout® 遺伝子ターゲティングは伝統的なESターゲティング技術に比べ、５〜６ヶ月の期間を短縮できます。コンディショナルノックアウトの場合、ファウンダーは直接特異Creマウスと交配して、ターゲティング遺伝子をノックアウトします。全プロジェクトには返金保証があり、ファウンダーが得られなかった場合は料金は頂いておりません。
各技術について
| TurboKnockout® | 従来の遺伝子ターゲティング | 従来のCRISPR/Cas遺伝子ターゲティング | |
|---|---|---|---|
| 作製期間 | 6～8ヶ月 | 最短12ヵ月 | 5～9ヶ月 |
| 導入方法 | Cyagen TurboKnockout®技術を用いたES細胞における相同組換え | 従来の技術を用いたES細胞における相同組換え | 前核インジェクションCRISPR/Casヌクレアーゼを用いた遺伝子ターゲティング |
| オフターゲット効果の影響 | なし | なし | あり |
| アプリケーション | ・コンディショナルノックアウト ・大きなフラグメントのノックイン ・ヒト化 |
・コンディショナルノックアウト ・大きなフラグメントのノックイン ・ヒト化 |
・全身ノックアウト ・点突然変異 ・短いフラグメントのノックイン |
| 大きなフラグメントの導入 | 可能 | 可能 | 不可能 |
| 生体系列遺伝の保証 | あり | あり | あり |
サービスの流れ
- ターゲット遺伝子の情報分析を行います。遺伝子構造、遺伝子座周囲の遺伝子、既知のターゲット動物モデルなどを含みます。
- ターゲットES細胞のPCRスクリーニング及びサザンブロット法の確認を含んだ遺伝子ターゲティング案を作成します。
- 確認及び同意のため、お客様に計画案を提出いたします。
- ターゲティングベクターにホモロジーアームと一致するDNAフラグメントをクローニングします。
- 制限酵素とシークエンシングで最終的なターゲティングベクター構築を確認します。
- エレクトロポレーションでターゲティングベクターをTurboKnockout® スーパーES細胞に送り込み、薬剤耐性遺伝子による選別を行います。一般的に、弊社のES細胞はC57BL/6菌株に由来します。また、弊社もBALB/cの誘導したES細胞を使用してサービスを提供します。
- ターゲットES細胞のPCRスクリーニングを行います。
- サザンブロット法の確認に続いて、PCR陽性クローンを増殖させます。
- 正しい染色体数を保証するため、ES細胞核型分析を行います。
- ES細胞を仮親マウスに移植します。F0は100%TurboKnockout® ES細胞から由来したヘテロマウスとなります。
- 変異状態を保証するため、ファウンダーのPCR検定を行います。
適応範囲
- コンベンショナルノックアウト
- コンディショナルノックアウト
- ノックイン
動物の健康状態
動物の健康状態は、多くの研究組織が要求する動物設備基準と一致しています。各種病原体検査は年四回実施しています。
