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Cre-ESCs遺伝子編集

Cre-ESCs遺伝子編集 技術は、先進的な遺伝子工学プラットフォームです。複雑な交配プロセスを省略し、サイヤジェン(Cyagen)独自のTurboKnockout™技術を活用することで、Cre-ESCsプラットフォームはFounder(F0)マウスにおいて99.9%のキメラ率を実現し、cKO/cKIホモ接合体をワンステップで取得できます。
Cre-ESCs1.webp

作製期間を大幅に短縮

作製期間をわずか4~5か月に短縮し、研究時間を節約。
Cre-ESCs2.webp

ワンステップでホモ接合体を取得

99.9%のキメラ率を実現したcKI/cKOホモ接合体をワンステップで取得。
Gene/Genetic/DNA 2@2x.webp

TurboKnockout™の高い信頼性

TurboKnockout™技術をベースに、オフターゲットフリー、知財面で安心、大断片にも対応。
テクノロジー
検証
FAQs
テクノロジー
Cre-ESCsの仕組み
Cre-ESCs技術は、組織特異的コンディショナルノックアウト(cKO)またはノックイン(cKI)マウスモデルを迅速かつ確実に作製できる、高度な遺伝子改変プラットフォームです。あらかじめ検証済みのCre発現胚性幹細胞にloxP配列で挟まれたアレルを直接導入することで、ホモ接合型Cre/loxPモデルをワンステップで取得でき、時間を要する交配工程を省略できます。
作製フロー
TurboKnockout™を基盤としたCre-ESCs:
比較
評価項目 TurboKnockout™を基盤としたCre-ESCs 従来型ESCs
F0世代で99.9%のキメラ率/ cKO/cKIホモ接合体をワンステップで取得 対応 非対応
cKO/cKIモデルの納期 4~5カ月 14カ月
特許上の問題 なし なし
大断片への適応性 優良 優良
オフターゲットリスク 極めて低い 極めて低い
染色体上の競合 なし あり(交配ではCreとloxPを同一染色体上に共存させることができません)
厳格な品質管理基準
Cre-ES細胞株を対象に構築した包括的な品質管理(QC)プロセスにより、すべてのモデルの信頼性を確保しています。
核型解析
染色体の安定性を確認します。
無菌試験・マイコプラズマ検査
清浄な細胞株であることを保証します。
性別判定・Cre PCR
遺伝子型の正確性を確認します。
検証
作製例:CD8 T細胞特異的LSL-tdTomatoホモ接合型マウス
ES細胞のPCR解析結果とファウンダーマウスのフローサイトメトリー解析結果を組み合わせることで、Cre-ESCsはF0世代において組織特異的な遺伝子発現を迅速かつ効率的に実現します。自然交配で作製したモデルと同等の性能を、より短期間で得ることができます。
図1.LSL-tdTomatoベクターのエレクトロポレーション後におけるES細胞のPCR同定
図2.マウス末梢血および脾臓由来CD8⁺ T細胞におけるtdTomato発現(Cre-ESCsにより作製したCD8 Cre⁺ tdTomato⁺マウス)
図3.マウス末梢血および脾臓由来CD8⁺ T細胞におけるtdTomato発現(自然交配により作製したCD8 Cre⁺ tdTomato⁺マウス)
FAQs

Frequently Asked Questions (FAQs)

cKO/cKIプロジェクトでは、どのようなマウスが納品されますか。

通常、雄のflox/flox、Cre+マウスをご提供します。ご要望に応じて、5匹、10匹、20匹、または40匹からお選びいただけます。

なぜ納品されるマウスは雄のみなのですか。

精子ドナーとして用いる雄マウスは、雌マウスと比べて生殖系列伝達効率が大幅に高いためです。これは、cKI/cKOホモ接合体として機能する99.9%超の高キメラ率を有するF0ファウンダーマウスを安定して作製するうえで重要です。
雌マウスや、さらなる交配に使用する安定したホモ接合系統が必要な場合は、納品された雄マウスを用いて通常の施設内交配を行うことで容易に取得できます。

F1世代の作製や追加交配は必要ですか。

いいえ。F0世代から直接、cKI/cKOホモ接合体マウスを取得できます。

特許やライセンスに関する懸念はありますか。

いいえ。Cre-ESCsサービスは、Cyagenが独自に開発したTurboKnockout™プラットフォームを基盤としており、特許上の問題はありません。

Cre-ESCsは「Chromosome Conflict(染色体競合)」の問題を解決できますか。

はい。従来の交配では、CreとloxPを同一染色体上に共存させることが難しい場合があります。Cre-ESCsでは細胞株の段階で直接遺伝子編集を行うため、この問題を回避し、染色体競合のリスクを解消できます。

引用データベース

Molecular Therapy: Methods & Clinical Development, March, 2025
Intracranial AAV administration dose-dependently recruits B cells to inhibit the AAV redosing
【その他】
Gut, February, 2025
E-twenty-six-specific sequence variant 5 (ETV5) facilitates hepatocellular carcinoma progression and metastasis through enhancing polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cell (PMN-MDSC)-mediated immunosuppression
【その他】
Cell Death & Disease, February, 2025
Mcm5 mutation leads to silencing of Stat1-bcl2 which accelerating apoptosis of immature T lymphocytes with DNA damage
【その他】
Molecular Therapy, February, 2025
Single-cell data-driven design of armed oncolytic virus to boost cooperative innate-adaptive immunity against cancer
【その他】
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