ノックイン（KI）マウスとは何ですか

ノックイン（KI）とは何ですか

ノックイン（knock-in, KI）マウスは、標的遺伝子位置に特定の突然変異または外来遺伝子を導入するか、レポーター遺伝子を同種再構成で標的遺伝子の特定位置に導入することにより、レポーター遺伝子の発現を通じて標的遺伝子の発現を追跡することができます。

遺伝子ノックイン（Knock-in）とは、標的遺伝子位置に特定の突然変異または外来遺伝子を導入し、例えば、標的遺伝子に突然変異を導入するか（人間遺伝病モデルを再現する）、レポーター遺伝子（例えばEGFP、RFP、mCherry、YFP、LacZ、Luciferase等）または発現必要な機能的cDNA（例えばCre、Dre等）を同種再構成で標的遺伝子の特定位置に導入することにより、レポーター遺伝子またはその他cDNAの発現を標的遺伝子の発現に一致させます。レポーター遺伝子またはcDNAでマウス自身の遺伝子を置換すると、ノックアウトとノックインが同時に発生します。ヒト由来遺伝子でマウス由来遺伝子を置換するまたはヒト由来cDNAをマウス由来遺伝子のATG位置に挿入することにより、ヒト化マウスモデルをカスタマイズすることもできます。

何故ノックイン（KI）マウスを使用するでしょうか

ノックイン（KI）マウスは薬品新標的の発見と臨床前の薬力学評価等、生物医学の研究に重要な理論的価値と臨床意義があります。

• 人類遺伝メカニズムを再現し、病原性メカニズムを探究します
• 追跡遺伝子の発現
• 系統追跡を行い、細胞の起源を追跡します
• マウス遺伝子をヒト化させ、薬品の研究開発を加速します
• 分子遺伝学ツールをマウスモデルに導入します

遺伝学ノックイン（Knock-in）モデルの分類

• 通常ノックイン：外来遺伝子を指定の位置に挿入します
• ROSA26ノックイン：Rosa26は安全なエリアであるため、外来遺伝子がこの遺伝子座に挿入されても、その他遺伝子の発現に影響を与えません。
• 点突然変異：点突然変異をマウス同種遺伝子の相応位置に導入します。
• 条件付き点突然変異：点突然変異をCre-LoxPシステムと結合し、マウス同種遺伝子の相応位置に導入することにより、組織の特異性点突然変異ができます。
• ヒト化：マウス由来遺伝子をヒト由来同種遺伝子に置換することにより、疾患、免疫、生理学研究および抗体薬品のスクリーニングと有効性の評価に用いられるヒト化遺伝子プロジェクトマウスモデルを構築します。

ノックイン（KI）マウスモデルの構築方法は何がありますか？

遺伝学ノックインマウスモデルは標的型遺伝子編集またはESターゲティング技術により構築できます。サイヤジェンは300 kbのラージフラグメントノックイン（LFKI）ができます。

図 1. TurboKnockout® と CRISPR/Cas9 を用いたノックイン技術の比較

ご興味をお持ちいただけましたら、[email protected]までお問い合わせください。

サイヤジェン株式会社について

サイヤジェン株式会社は15年間の発展を経て、全世界の数万人の科学研究者にサービスを提供しており、製品と技術は直接にCNS (Cell、Nature、Science)の定期刊を含む5,200余りの学術論文に応用されています。

ノックアウトマウス、ノックインマウス、コンディショナルノックアウトマウス、トランスジェニックマウス、GFPマウス、免疫不全マウス、無菌マウスなどのカスタマイズサービスを提供する以外、専門的な手術疾患モデルチームがあり、多種の複雑な小動物手術疾患モデルも提供できます。