我々は通常、全ての遺伝子改変マウスを「トランスジェニックマウス」と称している。実は、遺伝子改変マウスは3種の主なカテゴリーと7種のサブグループに分けられる。
1. トランスジェニック(Tg)
まず、プロモーター、エンハンサー、コードエリア、polyA等を含む発現ベクターを構築する。そして、発現ベクターを受精卵の細胞核に注入する。外来の発現ベクターが受精卵のゲノムに挿入された後、この受精卵を母マウスの輸卵管に移植して、子マウスに発育する。この子マウスは外来遺伝子を発現する。
2. コンベンショナルノックアウト(KO)
Crispr/Cas9システムを利用して、受精卵の目標遺伝子のコードエリアの両側でそれぞれ切断する。受精卵は断口を接続する過程で、断口の間のシーケンス(つまりコードエリア)を失う。この受精卵を母マウスの輸卵管に移植して、子マウスに発育する。この子マウスは目標遺伝子を発現できなくなり、目標遺伝子が完全に活性を失い、コンベンショナルノックアウトとして現れる。
3. 遺伝子ノックイン(KI)
まず相同腕と外来遺伝子を含むターゲットベクターを構築する。そして発現ベクターを顕微注射の方法で受精卵の細胞核に注入する。同時に、Crispr/Cas9システムを利用して受精卵の目的遺伝子の位置でゲノムDNAを切断する。受精卵は相同組換えによって外来遺伝子を定点的にゲノムに統合する。この受精卵を母マウスの輸卵管に移植して、子マウスに発育する。この子マウスは外来遺伝子を持っている。
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