遺伝子改変マウスの作製とは、受精卵の遺伝子を編集し、編集後の受精卵をマウスに育て、ファウンダーマウス(founder マウス)とする。このファウンダーマウスは全身の細胞が受精卵の分裂と複製に由来するため、全身のすべての細胞のゲノムは編集後の受精卵と全く同じである。最後にファウンダーマウスでの繁殖により系統を作って、大量の動物実験用マウスを獲得する。
遺伝子改変マウスの作製は6つのステップに分けられる。
①遺伝子編集の分子ツール(cas9、ターゲットベクターdonorなど)の作製
②メスを過剰排卵させ、オスと交配して大量の受精卵を獲得する。
③遺伝子編集ツールを受精卵内にマイクロ注射する。
④注射後の受精卵を母マウスの体内に移植する。
⑤子マウスの出生と鑑定スクリーニング。
⑥陽性のファウンダーマウスの繁殖と系統構築。
全体のフローチャート:
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